Cytochromes P450. Because cytochrom

Cytochromes P450. Because cytochromes P450 (P450) are the
most abundant of the drug-metabolizing enzymes found in liver,
numerous investigations have naturally focused on probing for the
presence of members of this enzyme family in human skin and skin
cells. Early work focused on demonstrating P450-like activity and
responsiveness to some inducers of these enzymes. As molecular
biology techniques have advanced, probes for specific enzymes have
been used and demonstrated the presence of numerous members of
this important enzyme family. Table 2 provides a summary of evidence
to date for the presence of these enzymes in human skin biopsy
samples or cultures of specific skin cells, together with representative
references supporting these findings.
Evidence for the presence of the CYP1A enzymes has been sought
by several investigators. Early studies demonstrating the ability of animal
skin to metabolize benzo[a]pyrene suggested expression of CYP1A1 in
skin. Indeed, CYP1A1 mRNA has been found in all human skin sources
probed to date, although data supporting expression of CYP1A1 protein
is limited to KCs (Baron et al., 2001; Saeki et al., 2002; Yengi et al.,
2003). In contrast, studies probing for CYP1A2 mRNA have found that
message for expression of this gene in skin or skin cells is undetectable
(Baron et al., 2001; Saeki et al., 2002). CYP1B1 mRNA has been readily
detected in skin biopsy samples and all skin cells examined to date (Baron
et al., 2001; Saeki et al., 2002; Smith et al., 2003; Yengi et al., 2003).
Studies probing for the presence of CYP2A6 have been limited to
probes for message and in cultured skin cells, with mixed results.
Although CYP2A6 mRNA was not detected in KCs, these same
investigators observed message in fibroblasts and melanocytes (Saeki
et al., 2002). Studies to date provide evidence for the expression of
CYP2B6 mRNA in skin biopsy samples and KCs, with the latter also
demonstrating the presence of CYP2B6 protein (Baron et al., 2001;
Yengi et al., 2003).
Probes for the expression of the CYP2C families of enzymes have
yielded varied results. Although CYP2C9 mRNA was demonstrated
in skin biopsy samples, message was not detectable in KCs or HaCaT
cells, an immortalized keratinocyte cell line (Yengi et al., 2003; Vyas
et al., 2006a). Assessment of the expression of CYP2C9 protein in
KCs and HaCaT cells by immunoblot were inconclusive (Vyas et al.,
2006a). CYP2C18 and CYP2C19 mRNA have both been detected in
skin biopsy samples, although assessment of protein expression has
yet to be reported.
Members of the important CYP3A family of enzymes have also
been detected in human skin or skin cells. CYP3A5 message and
protein have been identified in all skin cell types and biopsy samples
probed to date (Baron et al., 2001; Saeki et al., 2002; Smith et al.,
2003; Yengi et al., 2003; Vyas et al., 2006a). It is interesting to note
that whereas CYP3A4 message is readily detected in KCs, it has not
been observed in HaCaT cells (Vyas et al., 2006a). Because experimentalists
commonly use this immortalized cell line, it is important to
recognize that the pattern of metabolism in this cell line may not
match that seen in primary cells and in skin itself.
In general, studies that have probed both skin biopsy samples and
primary skin cell cultures have been consistent with regard to message
expression for specific CYP450s—expression is either present or
absent in both sample types. Two exceptions to this observation are
CYP2C9 and CYP2D6. Whereas message for these two enzymes was
observed in skin biopsy samples from the same laboratory, other
investigators have not detected message for these enzymes in cultured
KCs. It is unclear at this time whether this difference is due to a loss
of gene expression upon culture or methodological differences for
probing message between research groups. Hence, data to date suggests
that cultured cell models are appropriate for investigations of
TABLE 1
Primary cells in human skin as a function of layer
Epidermis Dermis Hypodermis
KCs Fibroblasts Adipocytes
LCs Dendritic cells
Melanocytes Monocytes
Merkel cells Dendrocytes
Mast cells
248 SVENSSON
Downloaded from dmd.aspetjournals.org at ASPET Journals on October 10, 2016
skin biotransformation for the CYP450s, with the exception of
CYP2C9 and CYP2D6.

Результаты (латышский) 1:

Cytochromes P450. Jo cytochromes P450 (P450) irvisvairāk bagātīgs atdod vielmaiņas procesam fermentu atrodami aknas,Daudzi pētījumi dabā ir vērsta uz zondēšana parcilvēku šo fermentu ģimenes locekļu klātbūtne ādu un ādasšūnas. Sākumā darbs koncentrējās uz demonstrējot P450 līdzīga aktivitāte unatsaucība, ar kādu inducers šos fermentus. Kā molekulārābioloģijas tehnoloģijas ir uzlabotas, zondes īpašus fermentus irizmantota un pierādīts daudz locekļu klātbūtnešo enzīmu svarīga ģimenes. 2. tabulā sniegts kospavilkums par pierādījumulīdz šim šos fermentus cilvēku ādas biopsija klātbūtnesparaugu vai kultūru īpaši ādas šūnas kopā ar pārstāviatsauces, atbalstot šos secinājumus.Pierādījumu klātbūtne CYP1A fermenti ir pieprasītapēc vairākiem izmeklētājiem. Agri pētījumi pierāda spēju dzīvniekuādas vielmaiņu benzo [a] pirēna ierosināja izpausme CYP1A1ādu. Patiešām, CYP1A1 PHOSPHATE atrodami visu cilvēka ādu avotuaptaustīja līdz šim, kaut arī dati, kas apliecina vārda CYP1A1 proteinir ierobežots līdz a (Baron et al., 2001; Saeki et al., 2002; Yengi et al.,2003). savukārt zondēšana CYP1A2 PHOSPHATE pētījumos ir konstatēts, kaziņojumam Šis gēns, ādas vai ādas šūnas izpausme ir nosakāma(Baron et al., 2001; Saeki et al., 2002). CYP1B1 PHOSPHATE ir viegliatklātās ādas biopsijas paraugos un visas ādas šūnās, pārbaudīja datumu (Baronet al., 2001; Saeki et al., 2002; Smith et al., 2003; Yengi et al., 2003).CYP2A6 klātbūtnes zondēšana pētījumi tika ierobežota līdzzondes, ziņojumu un kultivētās ādas šūnās ar dažāda.Lai gan a, tiem pašiem nav atklāta CYP2A6 phosphateizmeklētāji novēroto ziņojumu un fibroblastus (Saeki melanocītoset al., 2002). Pētījumi līdz šim sniegt pierādījumus par izpausmeCYP2B6 PHOSPHATE ādas biopsijas paraugos un a, ar tām arīdemonstrējot klātbūtni CYP2B6 protein (Baron et al., 2001;Yengi et al., 2003).Zondes CYP2C ģimenēm fermentu izpausme iriegūti dažādi rezultāti. Lai gan tika demonstrēta CYP2C9 phosphateādas biopsijas paraugos, ziņojums nebija nosakāms a vai HaCaTšūnas, immortalized keratinocītu šūnu līnija (Yengi et al., 2003; Vyaset al, 2006a). CYP2C9 protein, izteiksmes novērtējumsA un HaCaT šūnās, IgM bija nepārliecinošs (Vyas et al.,2006a). CYP2C18 un CYP2C19 PHOSPHATE gan tika noteiktasādas biopsijas paraugos, kaut arī proteīna izteiksmes novērtējums irvēl par to jāziņo.Fermentu svarīgi CYP3A ģimenes locekļi ir arīkonstatēti cilvēka ādas vai ādas šūnas. CYP3A5 ziņojumu unolbaltumvielas ir identificējušas visas ādas šūnu tipiem un biopsijas paraugosaptaustīja datums (Baron et al., 2001; Saeki et al., 2002; Smith et al.,2003; Yengi et al., 2003; Vyas et al, 2006a). Tas ir interesanti atzīmētka, tā kā viegli CYP3A4 ziņojums tiek konstatēta a, tā vēl navnovērotas HaCaT šūnās (Vyas et al, 2006a). Jo experimentalistsparasti tiek izmantotas šo immortalized šūnu līnijas, ir svarīgiatpazīt modeļa vielmaiņu šūnu rindā nedrīkstatbilstu šim redzējis primārās šūnu un ādu, pats par sevi.Kopumā pētījumi, kas ir probed, gan ādas biopsijas paraugus unprimārajā ādas šūnu kultūrās ir bijusi konsekventa attiecībā uz ziņojumuīpašas CYP450s izteiksmi — izpausme ir vai nu pašreizējā vaiklāt gan paraugu veidi. Ir divi izņēmumi attiecībā uz šo novērojumuCYP2C9 un CYP2D6. Tā kā šos divus fermentus ziņojums tikanovēro ādas biopsijas paraugos un tajā pašā laboratorijā, citiizmeklētāji nav konstatētas ziņojumu šos fermentus kultivētāsA. Nav skaidrs, šajā laikā, vai šī atšķirība ir sakarā ar zaudējumupar gēnu ekspresiju, kultūras vai metodikas atšķirībasZondēšanas ziņojumu starp pētniecības grupām. Tādējādi līdz šim dati liecinakultivētas šūnas modeļi ir piemēroti izmeklēšanas1. TABULACilvēka ādas slāņa funkcijas kā primārās šūnāsEpidermu dermā HypodermisA fibroblastus AdipocytesLCs Dendritic šūnasMelanocītos monocītosMerkela šūnu DendrocytesTuklo šūnu248 SVENSSONLejupielādēt no dmd.aspetjournals.org pie ASPET žurnāliem par 10 oktobris 2016ādas biotransformācija, CYP450s, izņemotCYP2C9 un CYP2D6.

Результаты (латышский) 2:

Citohromi P450. Jo Citohromi P450 (P450) ir
visvairāk bagātīgāka ar narkotikām metabolisko enzīmu atrodamas aknās,
daudzi pētījumi ir dabiski vērsta uz zondēšana par
klātbūtni biedru šā fermenta ģimenes cilvēku ādas un ādas
šūnām. Early darbs koncentrējās uz demonstrējot P450 līdzīgu aktivitāti un
atsaucību dažiem induktoriem šo enzīmu. Kā molekulārās
bioloģijas metodes ir uzlabotas, zondes īpašām enzīmu
tika izmantoti, un pierādīja klātbūtni daudzu biedru
šo svarīgo enzīmu ģimeni. 2. tabulā ir sniegts kopsavilkums par pierādījumu
līdz šim par klātbūtni šo enzīmu cilvēku ādas biopsijas
paraugos vai kultūru konkrētu ādas šūnām, kopā ar pārstāvošajām
atsaucēm atbalsta šos atzinumus.
Pierādījumi klātbūtnē CYP1A ir pieprasīta
vairāki izmeklētāji. Early pētījumi, kas pierāda spēju dzīvnieku
ādas vielmaiņu benzo [a] pirēna ierosināja izpausmi CYP1A1
ādā. Patiešām, CYP1A1 mRNS ir konstatēts visās cilvēka ādas avotiem
probed līdz šim, kaut arī dati, kas apliecina izpausmi CYP1A1 olbaltumvielu
ierobežo KCS (Baron et al, 2001;.. Saeki et al 2002;. Yengi et al,
2003). Turpretī pētījumi zondēšana CYP1A2 mRNS ir atraduši šo
ziņu izteikt šī gēna ādas vai ādas šūnām ir nenosakāms
(Baron et al, 2001;.. Saeki et al, 2002). CYP1B1 mRNS ir viegli
konstatēti ādas biopsijas paraugos, un visiem ādas šūnas pārbaudītajām līdz šim (Baron
et al, 2001;. Saeki et al 2002;. Smith et al, 2003;.. Yengi et al, 2003).
Pētījumi zondēšana klātbūtne CYP2A6 ir tikai
zondes par ziņu un kultivētām ādas šūnām, ar jaukto rezultātiem.
lai gan CYP2A6 mRNA netika konstatēts KCS, šie paši
izmeklētāji novērota ziņu fibroblastu un melanocītu (Saeki
et al., 2002). Pētījumi līdz šim nesniedz pierādījumus izpausmi
CYP2B6 mRNS ādas biopsijas paraugos un KCS, ar pēdējo arī
demonstrējot klātbūtni CYP2B6 olbaltumvielu (Baron et al, 2001;.
. Yengi et al, 2003).
Zondes izpausmi CYP2C ģimenes enzīmu
devuši dažādi rezultāti. Kaut arī CYP2C9 mRNA tika pierādīta
in ādas biopsijas paraugos, ziņa nebija nosakāms KCS vai HaCaT
šūnām, kas ir iemūžināts keratinocītu šūnu līnijas (Yengi et al, 2003;. Vyas
. Et al, 2006a). Novērtējums izpausmi CYP2C9 proteīna
KCS un HaCaT šūnu pa Immunoblot bija nepārliecinoši (Vyas et al.,
2006a). CYP2C18 un CYP2C19 mRNS abi ir konstatēti
ādas biopsijas paraugos, lai gan novērtējums proteīna ekspresija ir
vēl jāziņo.
Locekļi svarīgo CYP3A ģimenes fermentu ir arī
konstatēts cilvēka ādas vai ādas šūnām. CYP3A5 ziņu un
olbaltumvielu ir identificētas visos ādas šūnu veidu un biopsijas paraugos
probed līdz šim (Baron et al, 2001;. Saeki et al 2002;. Smith et al.
2003;. Yengi et al, 2003; Vyas et al ., 2006a). Tas ir interesanti atzīmēt,
ka, lai gan CYP3A4 ziņa ir viegli konstatēts KCS, tā nav
novērota HaCaT šūnās (Vyas et al., 2006a). Jo experimentalists
parasti izmanto šo iemūžināts šūnu līnijas, ir svarīgi
apzināties, ka modelis metabolisma šajā šūnu līnijā nedrīkst
mačs kas redzams Galvanisko elementu un pašā ādā.
Kopumā pētījumi, kas ir izpētīts gan ādas biopsija paraugus un
primāro ādu šūnu kultūrās ir bijis konsekvents attiecībā uz ziņojumu
vārda konkrētu CYP450s-izpausme ir vai nu klāt vai
trūkst abu paraugu veidiem. Divi izņēmumi šo novērojumu ir
CYP2C9 un CYP2D6. Tā kā ziņu par šiem diviem enzīmiem
in ādas biopsijas paraugos novērota no tajā pašā laboratorijā, citi
izmeklētāji nav konstatēti ziņu par šiem fermentu kultivētām
KCS. Tas ir skaidrs, šajā laikā, vai šī atšķirība ir saistīts ar zaudējumu
gēnu ekspresijas pēc kultūras vai metodoloģiskajām atšķirībām par
zondēšana ziņu starp pētniecības grupām. Tādējādi dati līdz šim liecina,
ka kultivētās šūnu modeļi ir piemēroti izmeklēšanas
tabulas 1.
Primārā šūnas cilvēka ādā kā funkciju slānis
epidermas dermā hypodermis
KCs fibroblastu adipocītos
LCS dendrītiskajās šūnās
Melanocītos Monocīti
Merkele šūnu Dendrocytes
tuklās šūnas
248 SVENSSON
lejupielādēt no dmd.aspetjournals .org at ASPET žurnāli gada 10. oktobrī, 2016.
ādu biotransformācijas attiecībā uz CYP450s, izņemot
CYP2C9 un CYP2D6.