Identification and quantification o

Identification and quantification of point mutations by mispairing PCR
To analyze the T1843C, A1940G and A2623G point mutations in the 16S rRNA gene by mispairing PCR, part of the mitochondrial ribosomal gene was amplified by 1486-For (cccgtcaccctcctcaagtatacttca) and 3015-Rev (ccatcgggatgtcctgatccaaca). The amplified fragment served as target for the nested amplifications with the following primer sets. Characterizations of nucleotides 1843 and 1940 were carried out by nested amplification utilizing the primer combinations wt/mut1819-For and wtA1960- Rev, wt/mut1819-For and mutG1960-Rev; analysis of position 2623 was realized by amplifying fragments utilizing the primer combinations 2559-For and wtA2650-Rev and 2559-For and mutG2650-Rev. The following primers were utilized during mispairing PCR amplification (bold nucleotides indicate modified nucleotides that introduce a partial cleavage sequence that is completed either by the following wild-type or mutant sequence):

Результаты (русский) 1:

Выявление и количественная оценка точечные мутации, mispairing ПЦР
для анализа T1843C, A1940G и A2623G точечные мутации гена 16S рРНК, mispairing ПЦР, часть митохондриальных генов рибосомных был дополнен 1486-для (cccgtcaccctcctcaagtatacttca) и 3015-Rev (ccatcgggatgtcctgatccaaca). Усиленные фрагмент, служил мишенью для вложенных амплификаций грунтом следующим устанавливает. Характеристики нуклеотидов 1843 и 1940 были проведены вложенные амплификации, используя грунт комбинации wt/mut1819-для и wtA1960-Rev, wt/mut1819- и mutG1960-Rev; Анализ позиции 2623 был реализован путем усиления фрагментов, используя праймер комбинации 2559-для и wtA2650-Rev и 2559-для и mutG2650-Rev. Во время mispairing ПЦР-амплификации (жирным нуклеотидов указывают модифицированных нуклеотидов, которые вводят последовательность частичного расщепления, завершено либо дикого типа и мутанта последовательность) использовались следующие грунты:

Результаты (русский) 2:

Идентификация и количественное определение точечных мутаций на mispairing ПЦР
Для анализа T1843C, A1940G и A2623G точечные мутации в гене 16S рРНК по mispairing ПЦР, часть митохондриальной рибосомной гена усиливается 1486-For (cccgtcaccctcctcaagtatacttca) и 3015-Rev (ccatcgggatgtcctgatccaaca) . Усиленный фрагмент служил мишенью для вложенных амплификации со следующими наборов праймеров. Характеризации нуклеотидов 1843 и 1940 годов были проведены вложенного усиления использования комбинации праймеров wt/mut1819-For и wtA1960-REV, wt/mut1819-For и mutG1960-REV; Анализ положения 2623 был реализован путем усиления фрагменты, использующие комбинации праймеров 2559-за и wtA2650-REV и 2559-за и mutG2650-Rev. Следующие праймеры использовали в течение mispairing ПЦР-амплификации (жирный нуклеотиды показывают модифицированные нуклеотиды, которые вводят частичную последовательность расщепления что завершено либо с помощью следующего дикого типа или мутантного последовательности):

Результаты (русский) 3:

Идентификация и количественное определение точки мутаций в mispairing PCR
для анализа T1843C, A1940G и A2623G точка мутаций в 16S rRNA, генов mispairing PCR, часть возбудителей вилта митохондрий гена были подкреплены 1486-для (cccgtcaccctcctcaagtatacttca) и что и в 3015-Rev (ccatcgggatgtcctgatccaaca).Усиленный фрагмент служит цели для вложенных усиления с помощью следующих грунтовки. Характеристиками нуклеотидов 1843 и 1940 годов были проведены вложенные усиление использования грунтовки комбинации wt/mut1819-и WTA1960- Rev, wt/mut1819-и mutG1960-Rev;Анализ позиции 2623: был реализован амплификации фрагментов с использованием грунтовку комбинации 2559-и WTA2650-ред. и 2559-и mutG2650-Rev. В следующей грунтовки, использовались в течение mispairing PCR усиление (bold нуклеотиды указывают на изменения нуклеотиды, частичный расколу последовательности, либо после дикой или мутировавших последовательности):