Metabolism of growth hormone releas

Metabolism of growth hormone releasing peptides.
Thomas A1, Delahaut P, Krug O, Schänzer W, Thevis M.
Author information
Abstract
New, potentially performance enhancing compounds have frequently been introduced to licit and illicit markets and rapidly distributed via worldwide operating Internet platforms. Developing fast analytical strategies to follow these new trends is one the most challenging issues for modern doping control analysis. Even if reference compounds for the active drugs are readily obtained, their unknown metabolism complicates effective testing strategies. Recently, a new class of small C-terminally amidated peptides comprising four to seven amino acid residues received considerable attention of sports drug testing authorities due to their ability to stimulate growth hormone release from the pituitary. The most promising candidates are the growth hormone releasing peptide (GHRP)-1, -2, -4, -5, -6, hexarelin, alexamorelin, and ipamorelin. With the exemption of GHRP-2, the entity of these peptides represents nonapproved pharmaceuticals; however, via Internet providers, all compounds are readily available. To date, only limited information on the metabolism of these substances is available and merely one metabolite for GHRP-2 is established. Therefore, a comprehensive in vivo (po and iv administration in rats) and in vitro (with human serum and recombinant amidase) study was performed in order to generate information on urinary metabolites potentially useful for routine doping controls. The urine samples from the in vivo experiments were purified by mixed-mode cation-exchange solid-phase extraction and analyzed by ultrahigh-performance liquid chromatography (UHPLC) separation followed by high-resolution/high-accuracy mass spectrometry. Combining the high resolution power of a benchtop Orbitrap mass analyzer for the first metabolite screening and the speed of a quadrupole/time-of-flight (Q-TOF) instrument for identification, urinary metabolites were screened by means of a sensitive full scan analysis and subsequently confirmed by high-accuracy product ion scan experiments. Two deuterium-labeled internal standards (triply deuterated GHRP-4 and GHRP-2 metabolite) were used to optimize the extraction and analysis procedure. Overall, 28 metabolites (at least three for each GHRP) were identified from the in vivo samples and main metabolites were confirmed by the human in vitro model. All identified metabolites were formed due to exopeptidase- (amino- or carboxy-), amidase-, or endopeptidase activity.

Результаты (русский) 1:

Метаболизм гормона роста, выпуская пептиды.Thomas А1, Delahaut P, O круг, Schänzer W, Thevis М.Информация об автореАннотацияНовые, потенциально повышение производительности соединений часто были введены для законных и незаконных рынков и быстро распространяется через во всем мире работы Интернет-платформы. Разработка быстро аналитической стратегии следовать эти новые тенденции является одним наиболее сложных проблем для современных допинг контроль анализ. Даже если ссылка соединений для активных наркотиков легко получен, их неизвестные метаболизм осложняет эффективных стратегий тестирования. Недавно новый класс малых C-неизлечимо amidated пептидов состоит из четырех-семи аминокислотных остатков получил значительное внимание наркотиков спорта власти из-за их способности стимулировать выпуск гормона роста из гипофиза. Наиболее перспективными кандидатами являются рост гормона рилизинг пептид (РПГР) -1, -2, -4, -5, -6, Гексарелин, alexamorelin и ipamorelin. С освобождением от РПГР-2 представляет сущность этих пептидов nonapproved Фармацевтика; Однако через Интернет-провайдеров, все соединения легко доступны. На сегодняшний день, только ограниченная информация на метаболизм этих веществ и лишь один метаболит РПГР-2 установлен. Таким образом всеобъемлющей в естественных условиях (po и iv администрация крыс) и в пробирке (с сыворотки крови человека и рекомбинантных amidase) исследование проводилось с целью получения информации о мочевых метаболитов потенциально полезных для процедуры допинг-контроля. Образцы мочи в экспериментах in vivo были очищены методом экстракции твердофазный смешанного катионного обмена и анализируются сверхвысокой производительности жидкостной хроматографии разделение (UHPLC), после чего масс-спектрометрии высокого разрешения/высокая точность. Сочетание высокого разрешения власть настольная Орбитрэп масс-анализатор для первого скрининга метаболит и скорость инструмента (Q-TOF) четырехполюсника/время прохождения для идентификации, мочевых метаболитов были проверены посредством анализа чувствительных полное сканирование и впоследствии подтверждена высокая точность продукта Ион сканирования экспериментов. Два меченных дейтерием внутренние стандарты (тройной транс РПГР-4 и РПГР-2 метаболита) были использованы для оптимизации процедуры извлечения и анализа. В целом, 28 метаболитов (по крайней мере трех для каждой РПГР) были выявлены в естественных условиях образцов и основные метаболиты были подтверждены моделью человека в пробирке. Все идентифицированные метаболиты были сформированы благодаря Экзопептидазы - (амино - или карбоксильную-), amidase-, или активности эндопептидазы.

Результаты (русский) 2:

Метаболизм высвобождения гормона роста пептиды.
Томас A1, Delahaut P, Круг вывода, Schanzer W, Thevis М.
Информация об авторе
Аннотация
Новые соединения потенциально усиления работы часто были введены в законных и незаконных рынков и быстро распространяется через по всему миру, работающих на платформе Интернет. Быстро развивается аналитические стратегии соблюдать эти новые тенденции является одним из самых сложных вопросов для современного анализа допинг-контроля. Даже если контрольные соединения для активных препаратов легко получить их неизвестно метаболизм усложняет эффективных стратегий тестирования. В последнее время, новый класс небольших С-терминально амидированный пептидов, содержащих 6:56 аминокислотных остатков значительное внимание спортивной лекарственной органы из-за их способности стимулировать высвобождение гормона роста из гипофиза. Наиболее перспективными кандидатами являются высвобождающий гормон роста пептид (GHRP) -1, -2, -4, -5, -6, гексарелин, alexamorelin и ipamorelin. С освобождением GHRP-2, организация этих пептидов представляет несанкционированной фармацевтических препаратов; Однако, с помощью Интернет-провайдеров, все соединения легко доступны. На сегодняшний день, лишь ограниченная информация о метаболизме этих веществ доступны и лишь один метаболит для GHRP-2 установлена. Таким образом, комплексный в естественных условиях (PO и внутривенного введения у крыс) и в пробирке (с человеческой сывороткой и рекомбинантным амидазы), было проведено исследование с целью получения информации о мочевых метаболитов потенциально полезных для обычных антидопингового контроля. Образцы мочи из экспериментов в естественных очищали смешанного режима катионообменной твердофазной экстракции и анализировали с помощью жидкостной хроматографии сверхвысокого разрешени (UHPLC) с последующим разделением с высоким разрешением / высокоточного масс-спектрометрии. Сочетает в себе высокую разрешающую способность настольной Orbitrap масс-анализатора для первого скрининга метаболита и скорость квадрупольного / время пролета (Q-TOF) инструмент для идентификации, мочевыводящих метаболиты были обследованы с помощью чувствительного полного анализа сканирования и затем подтверждено высокой точности экспериментов ионное произведение сканирования. Два внутренних стандартов дейтеромеченых (трижды дейтерированный GHRP-4 и GHRP-2 метаболита), были использованы для оптимизации процедуры экстракции и анализа. В целом, 28 метаболитов (по крайней мере, три для каждого GHRP) были определены на образцах в естественных условиях, и основные метаболиты были подтверждены человека в пробирке модели. Все выявленные метаболиты образуются в результате exopeptidase- (амино- или карбокси), amidase- или эндопептидазной деятельности.

Результаты (русский) 3:

Метаболизм и гормона роста отпуская бактерий до.
Томас A1, Delahaut P, Тельмы Крюг O, Schänzer ВТ, Thevis M.
информация об авторе
абстрактные
новых, потенциально повышения производительности соединений часто были введены на законных, так и незаконных рынков и быстро распространяются через всемирную сеть по интернет-платформ.развивающихся быстрыми аналитическими стратегий для последующей деятельности по итогам этих новых тенденций является одной из наиболее сложных проблем для современной допинг контроль анализ. Даже если ссылка соединений для активного наркотиков легко получить, их неизвестных метаболизма осложняет эффективное тестирование стратегий. В последнее время,Новый класс малых C-неизлечимо amidated сывороточного состоит из четырех до семи аминокислотных остатков было уделено значительное внимание спортивных проверки органами из-за их способность стимулировать гормона роста выпуска с гипофиз. Наиболее перспективных кандидатов, гормона роста отпускание почему некоторые нервные клетки выживают (GHRP) -1, -2, -4, -5, -6, hexarelin, alexamorelin и ipamorelin.С освобождением от GHRP-2, организация этих сывороточного представляет собой несанкционированной фармацевтических средств; однако, с помощью Интернет-провайдеров, всех соединений, которые легко доступны. На сегодняшний день лишь ограниченную информацию о метаболизма этих веществ и просто один метаболит для GHRP должности класса Д-2 не установлено. Таким образом,Всеобъемлющей в условиях in vivo (po и iv администрации в крыс) и in vitro (с сыворотку и рекомбинантного amidase) исследование было выполнено в целях получения информации о мочевыделительной метаболитов потенциально полезна для стандартных допинг контроля.В проб мочи от в условиях in vivo экспериментов, которые очищенной, смешанный режим микрофауны твердотельный этап добычи и проанализированы сверхмассивных-производительность жидкостной хроматографии (UHPLC) с высоким разрешением и высокой точностью масс-спектрометрии.Сочетание высокой мощности benchtop Orbitrap масса анализатора для первый метаболит скрининг и скорость квадрупольных/времени полета (Q-TOF) документа для идентификации, мочевыделительной метаболитов были проверены с помощью чувствительных полное сканирование анализ и впоследствии подтверждена высокая точность продукт-ионного сканирования экспериментов.Два дейтерия-с маркировкой внутренних стандартов (всему комплексу (GHRP-4 и GHRP должности класса Д-2 метаболит) были использованы для оптимизации извлечения и анализа процедуры. В целом, 28 метаболитов (по крайней мере три для каждого GHRP) были определены in vivo образцы и основных метаболитов были подтверждены правам in vitro модели. Всех выявленных метаболитов были сформированы из-за exopeptidase- (аминокислоты или carboxy- ),Amidase-, или endopeptidase деятельности.